用被測化合物的純品作為標(biāo)準(zhǔn)樣品，配制成一系列的已知濃度的標(biāo)樣。注入色譜柱的到其響應(yīng)值（峰面積）。

在一定范圍內(nèi)，標(biāo)樣的濃度與響應(yīng)值之間存在較好的線性關(guān)系，即W=f×A，制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。

在*相同的實驗條件下，注入未知樣品，得到欲測組分的響應(yīng)值。根據(jù)已知的系數(shù)f，即可求出欲測組分的濃度。

外標(biāo)法的優(yōu)點：

操作、計算簡單，是一種常用的定量方法；無需各組分都被檢出、洗脫；需要標(biāo)樣；標(biāo)樣及未知樣品的測定條件要一致；進(jìn)樣體積要準(zhǔn)確。

外標(biāo)法缺點：

實驗條件要求高，如檢測器的靈敏度，流速、流動相組成的不能發(fā)生變化；每次進(jìn)樣體積要有好的重復(fù)性。

 

2、內(nèi)標(biāo)法

操作：

將已知量的內(nèi)標(biāo)樣加入標(biāo)準(zhǔn)樣品，制成混合標(biāo)樣，并配制一系列的已知濃度的工作標(biāo)樣?；旌蠘?biāo)樣中標(biāo)樣與內(nèi)標(biāo)樣的摩爾比不變。注入色譜柱，以（標(biāo)樣峰面積/內(nèi)標(biāo)樣峰面積）為響應(yīng)值。根據(jù)響應(yīng)值與工作標(biāo)樣濃度之間存在的線性關(guān)系，即W=f×A，制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。

將已知量的內(nèi)標(biāo)樣加入未知樣品，注入色譜柱，得到欲測組分的響應(yīng)值。根據(jù)已知的系數(shù)f，即可求出欲測組分的濃度。

內(nèi)標(biāo)法的特點：

操作過程中樣品和內(nèi)標(biāo)是混合在一起注入色譜柱的，因此只要混合溶液中被測組分與內(nèi)標(biāo)的量的比值恒定，上樣體積的變化不會影響影響定量結(jié)果。內(nèi)標(biāo)法抵消了上樣體積，乃至流動相、檢測器的影響，因此比外標(biāo)法精確。