c18色譜柱分離效能高??蛇x擇固定相和流動相以達(dá)到較佳分離效果,比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。
c18色譜柱的系統(tǒng)由儲液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),在兩相中作相對運(yùn)動時,經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產(chǎn)生較大的差別,被分離成單個組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測器時,樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
c18色譜柱需要怎么清洗?
一般反相色譜,經(jīng)常會用到緩沖鹽。而百鹽對于色譜柱傷害比較大。如果鹽堵在色譜柱里面那柱子就廢了。所以需要把它沖掉。最好是每次都沖掉。
如果你的柱子流動相里面沒有鹽,那就沒必要沖洗了。
沖洗方法:反相柱子最好保存度在純甲醇或者純乙腈里面,但是鹽不溶于純有機(jī)相。所以中間過渡甲醇水或者乙腈水。
究竟用什么,要看你的流動相。
比如,我用的是磷酸鹽緩沖液-乙腈(70:30)的流動相,那么沖洗的時候最好選用10%-15%乙腈水,沖洗1.0ml/min,至少30min,最好40min。
如果第二天接著使用的話可以不*純甲回醇或者純乙腈封存了。如果第二天不用,最好用純的有機(jī)相封上柱子,同樣是1.0ml/min流速沖洗30min。
另,也不是說不清洗就會壞。我們研發(fā)有的時候為了趕項目,來不及沖洗色譜柱。柱子不會怎么樣。就是壽命會短一點而已。